Testul de epuizare cod (metoda c4-a)

Testul de epuizare COD (Metoda C4-A)

1. PRINCIPIUL METODEI

Un volum masurat de mediu mineral inoculat, ce contine o concentratie cunoscuta de substanta de testat (10 - 40 mg COD/l) ca singura sursa nominala de carbon organic, este aerat la intuneric sau lumina difuza la 22±2 sC.

Degradarea este urmata de analiza COD la intervale frecvente pe o perioada de 28 de zile. Gradul de biodegradare se calculeaza exprimand concentratia COD indepartata (corectata in functie de cea din martorul cu inocul ) ca procent din concentratia prezenta initial. Gradul de biodegradare primara poate fi de asemenea calculat din analiza chimica suplimentara facuta la inceputul si sfarsitul incubar

2. DESCRIEREA METODEI

2.1. Aparatura:

(a)     Vase conice, de exemplu, 250 ml -2 litri in functie de volumul necesar pentru analiza COD

(b)            Agitatoare pentru vase conice, fie cu control automat al temperaturii, fie fara acest control, dar folosite intr-o incapere cu temperatura constanta si de putere suficienta pentru a mentine conditiile aerobe in toate flacoanele

(c)     Aparatura de filtrare cu membrane adecvate

(d)            Analizor COD

(e)     Oxigenometru

(f)     Centrifuga

2.2.Prepararea mediului mineral

Pentru prepararea solutiilor stoc vezi 1.6.2.

Se amesteca 10 ml de solutie (a) cu 800 ml apa de dilutie, se adauga cite 1 ml din solutiile (b) - (d) si se completeaza pana la 1 litru cu apa de dilutie

2.3.Prepararea si adaptarea inoculului

Inoculul poate proveni dintr-o varietate de surse: efluenti uzati , ape de suprafata, soluri sau dintr-un amestec al acestora.

A se vedea 1.6.4., 1.6.4.1., 1.6.4.2. si 1.6.5.

2.4. Pregatirea vaselor

De exemplu, se introduc cate 800 ml de mediu mineral in vase conice de 2 litri si se adauga volume suficiente de solutii stoc ale substantelor de testat si de referinta in fiecare vas pentru a obtine o concentratie a substantei chimice echivalenta cu 10-40 mg COD /l. Se verifica valorile pH si se ajusteaza, daca este cazul la 7,4. Se inoculeaza vasele cu namol activ sau cu o alta sursa de inocul (a se vedea 1.6.4.), pentru a obtine o concentratie finala nu mai mare de 30 mg materii in suspensie/l. De asemenea, se prepara probe de inocul pentru control in mediu mineral, dar fara substanta chimica de testat sau de referinta.

Daca este cazul, se foloseste un vas pentru a verifica efectul inhibitor posibil al substantei chimice de testat, inoculand o solutie ce contine, in mediu mineral, concentratii comparabile ale ambelor substante chimice de testat si de referinta.

De asemenea, daca se cere, se mai foloseste un vas steril pentru a verifica daca substanta chimica de testat este degradata abiotic, prin utilizarea unei solutii neinoculate a substantei chimice (vezi 1.6.6).

Suplimentar, daca se banuieste ca substanta de testat este adsorbita semnificativ pe sticla, namol, etc, se face o estimare preliminara pentru a determina limita posibila a adsorbtiei si astfel adecvabilitatea testarii pentru substanta chimica respectiva (vezi tabel 1). Se utilizeaza un vas ce contine substanta de testat, inocul si agent de sterilizare.

Se completeaza volumele in toate vasele pana la 1 litru cu mediu mineral si, dupa amestecare, se ia o proba din fiecare vas pentru a determina concentratia initiala a COD (vezi Anexa 4). Se acopera orificiile vaselor, de exemplu, cu folie de aluminiu, astfel incat sa se permita schimbul liber de aer intre vas si atmosfera inconjuratoare. Se monteaza apoi vasele pe agitatoare pentru inceperea testului.

2.5. Numarul de vase intr-o testare tipica

Vasele 1 si 2:     suspensia de testat

Vasele 3 si 4:     martor cu inocul

Vasul 5:     procedura martor

De preferinta si cand este necesar se folosesc:

Vasul 6:     martor steril abiotic

Vasul 7:     martor adsorbtie

Vasul 8:     martor toxicitate

Vezi si 1.6.7.

2.6. Efectuarea testului

In timpul testarii, se determina concentratiile COD in fiecare vas in duplicat la intervalele de timp cunoscute, suficient de frecvent pentru a putea determina inceputul ferestrei de 10 zile si indepartarea procentuala la sfarsitul ferestrei de 10 zile. Se ia numai volumul minim al suspensiei de testat necesar pentru fiecare determinare.

Inainte de prelevarea probelor, se completeaza pierderile cauzate de

evaporare, adaugand apa de dilutie (1.6.1) in cantitatea necesara, daca este cazul. Se amesteca mediul de cultura foarte bine inainte de prelevarea unei probe si se asigura ca materialul ce adera pe peretii vaselor este dizolvat sau in suspensie, inainte de

prelevare.

Se filtreaza prin membrana sau se centrifugheaza proba (vezi Anexa 4), imediat dupa ce a fost prelevata. Se analizeaza probele filtrate sau centrifugate in aceeasi zi, sau se depoziteaza la 2-4sC timp de max. 48 ore sau se mentin la temperaturi mai mici de -18 sC pentru un timp mai indelungat.

3. Date si raportare

3.1. Interpretarea rezultatelor

Se calculeaza degradarea in procente la timpul t conform celor de la paragraful 1.7.1 (determinare COD) si optional de la 1.7.2. (analize specifice).

Se inregistreaza toate rezultatele pe fisele de date prevazute.

Validarea rezultatelor

Vezi 1.5.2.

3.3. Raportarea

Vezi 1.8.

4. Fisa de date

Un exemplu de fisa de date este prezentat mai jos.

TESTUL DE EPUIZARE COD

laborator

Data inceperii testului

Substanta de testaT

Denumire:

Concentratia solutiei stoc: mg/l ca substanta chimica

Concentratia initiala in mediu, t₀: mg/l ca substanta chimica

inocul

Sursa:

Tratamentul aplicat:

Preadapatare, daca exista:

Concentratia materiilor in suspensie in amestecul de reactie: mg/l

5.Determinari carbon

Analiza carbon:

6. Evaluarea datelor brute

* D₁ si D₂ nu trebuie exprimate ca medie, daca exista o diferenta considerabila.

Nota: formate similare se pot folosi pentru substantele de referinta si pentru controalele de toxicitate.

7. MARTOR abiotic (optional)

C_s(0) + C_s(t)

% degradare abiotica = ----- ----- ---- x 100

C_s(0)

8. AnalizE chimicE specificE (optional)